目前世界上已有20多個國家30多個單位生產60多種治療用的單價、雙價和多價抗蛇毒 血清，計100多種，它是目前公認的治療蛇傷的有效藥物。藥用抗蛇毒血清的制備在原理和基 本方法上與實驗室研究用的抗蛇毒血清相似，但在選擇動物和抗原等方面有些差異，這里就有 關差異的問題作些簡單的介紹。

抗原的選擇與制備用作抗原的蛇毒一般選分布廣、傷害人多、死亡率高并具有 抗原譜廣(即具有區域代表性)的毒蛇蛇毒。這樣的蛇毒制取的抗蛇毒血清不但能中和該 蛇毒，而且能中和其他相似毒蛇的蛇毒，具有很高的應用價值和經濟效益。一旦選擇好了 使用的抗原，下一步就應該對此制備蛇毒。用作抗原的蛇毒一般應由專人提取，商品蛇毒 往往因混有其他蛇毒或雜質而影響抗血清的制備。一般選擇健康毒蛇，以咬皿擠壓法采集 蛇毒，新鮮毒液經2 500r/min離心20min，取上清液冰凍干燥成粉狀后備用。給動物進行 免疫之前，蛇毒必須經除菌處理，因為蛇毒經毒蛇的口腔排出時，常被一些致病微生物(如 葡萄球菌、鏈球菌、破傷風梭狀桿菌和氣性壞疽桿菌等以及腦炎病毒)污染。蛇毒是一種復 雜的混合物，一種蛇毒約含有5種?15種酶，3種?12種非酶蛋白和多肽以及至少6種 其他物質。同時，與毒性相關的往往是蛇毒中對熱穩定的低分子量多肽，這類物質的抗原 性較差，若加大免疫劑量以增強免疫動物的刺激性，在免疫過程中會造成動物死亡。這個 問題可由兩種方法解決，一是對抗原加佐劑以提高免疫作用；二是對抗原做減毒處理，使 之能用較大的劑量免疫動物而不會引起動物死亡。常用的佐劑有福氏佐劑、可溶性淀粉、 南洋面包木薯粉、可溶性羧甲基纖維素、氫氧化鋁凝膠和海藻酸鈉等。在制備抗蛇毒血清 時一般采用不完全的福氏佐劑，即羊毛脂和石蠟油。佐劑能增強免疫作用，一般認為它具 有推遲抗原的排泄、延長抗原刺激機體的時間，更主要的是它能激發網狀內皮系統組織細 胞的增生，促進巨噬細胞的活力，因而能提高機體的免疫反應。抗原的減毒方法很多，目的 是減低抗原的毒性但不改變或基本不改變抗原的抗原性。在光氧化減毒、過氧化、氫氧化 減毒和福爾馬林處理減毒等方法中，福爾馬林處理減毒效果較好。在一'定濃度下，用福爾 馬林處理2周，可使毒蛇的毒性大部分喪失而抗原性基本不變，這在免疫過程中將會得到 較為滿意的效果。

動物免疫制備抗蛇毒血清用的動物可選用馬或羊，最早有用羊為實驗動物的， 但現在制備商品抗血清全都用馬。這是因為馬體型大，采血量多，易飼養，同時對蛇毒抗原 比較敏感。對馬的選擇主要是體型大而健壯，其他條件都是次要的。選擇好的馬需經過檢 疫，因為有的馬帶有某種病菌，這樣的馬血清注入人體會帶來不良的后果。

關于如何免疫動物才能獲得好的效果，這與多種因素有關，各家都有自己的經驗。一 般馬經免疫后可多次放血，每次放血后再進行適當的免疫。對馬初次免疫和采血后再免疫 的方法不同，初次免疫時常常分兩步進行，即先給免疫動物注射少量的蛇毒后，讓動物休 息2個月左右再進行正式免疫,劑量逐漸加大，每次間隔1周，直至免疫成功為止。對于注 射部位、免疫程序、抗原劑量、采血量、休息時間和馬匹選擇等都是應注意的重要因素。

馬經免疫一段時間后，從頸靜脈采取血樣，測定血清(或血漿）的效價。測試數次后，若 試血結果已經達到要求的效價，則可于末次注射后數日內（通常1周）采血。試血的一般要 求為lml血清加lml含不同劑量蛇毒（LD5。或MID)，混合后在37°C放置45min?60min 后注射到體重20g的小鼠體內，以動物不死的蛇毒較高劑量為該血清試血效價，達到要求 效價水平，才可放血。放血從馬頸靜脈進行，以檸檬酸鈉為抗凝劑。放血量的多少可根據 馬體型的大小而定，一般可以放出8L?10L血，隔3天可以再放一次血，以后休息。血液 經離心后分離出紅細胞，血漿加防腐劑保存在2C?lO'C暗處，自分離之日起至少要貯存 1個月，方可用于制備抗蛇毒血清。血細胞可以丟棄不用，也可以重新送回到原馬的體內， 這樣可以使馬快速恢復健康，縮短          第二次采血的時間，但工作量較大，要無菌操作，否則會 給實驗動物帶來危害。

抗血清的提純馬血漿中含有多種蛋白質，這些蛋白質的含量很大，而有效成分 卻較少。馬血漿中的蛋白質屬于異體蛋白，進入人體的量如過多就會使人產生不良反應, 如血清病和過敏反應等。另一方面，不加處理的血漿由于蛋白成分太多，容易變質，不易貯 存。現在一般的做法是對血漿進行提純處理，提取出有效的免疫球蛋白IgG。不但如此，還 采用胃酶消化除去IgG分子中無中和毒素作用的Fc部分。抗蛇毒血清的提取方法基本 采用破傷風抗毒素生產方法，即采用胃酸消化、硫酸銨沉淀、明礬吸附等工藝，其工藝過程 分以下幾步：

(1)消化加溫:將免疫血漿稀釋2倍?3倍調至適宜的pH后，加入一定量胃蛋白酶和 甲苯，在一定溫度下作用一定時間，然后加入15%硫酸銨，pH調至5. 0左右，加溫至57€ ?58'C 30min，冷卻過濾，取濾液。