電泳速度與電泳遷移率是兩個不同的概念，電泳速度是指單位時間內移動的距離 (cm/t)，而遷移率是指單位電場強度下的電泳速度.但二者又是密切相關的， 電泳速度越大，遷移率也越大。影響電泳速度的因素有較多，如樣品、電場強度、緩沖 液、支持介質等。

(—)樣品

被分離物的帶電荷量多少和電泳速度的關系成正比。帶電荷量多，電泳速度快，反
之則慢。此外，被分離物質若帶電量相同，分子量大的電泳速度慢，分子量小的電泳速 度快.，故分子大小與電泳速度成反比。球形的分子要比纖維狀的分子速度快。

(二） 電場強度

電場強度和電泳速度成正比關系。電場強度以每厘米的電勢差來計算，也稱電勢梯度。如 紙電泳的濾紙長15cm，兩端電壓（電勢差）為150V，則電場強度為150/15 = 10V/cm。電 場強度愈高，則帶電粒子的移動愈快。電壓增加，相應電流也增大，如過大，易產生熱效應， 使蛋白變性而不能分離。如高壓電泳（電場強度>50V/cm)必需加裝冷卻系統。

(三） 緩沖液

緩沖液的pH值各種氨基酸和蛋白質均具有不同的等電點。當緩沖液pH值處 于氨基酸和蛋白質的等電點，則它們處于帶正負電荷相等的等電狀態，在一定電場下，不 會向正負極移動。當pH值大于等電點時，氨基酸和蛋白質帶負電，向正極移動。根據各 種氨基酸和蛋白質的等電點不同，用固定pH值（如pH8. 6)的巴比妥緩沖液，加上一定 電場，使各種氨基酸或血清蛋白進行分離。凡氨基酸或蛋白質等電點與緩沖液pH值遠離 較大的，帶電荷就越多，電泳速度就快，反之電泳速度就慢。

緩沖液的離子強度離子強度對電泳的影響是：離子強度低，電泳速度快，分離 區帶不易清晰；離子強度高，電泳速度慢，而區帶分離清晰。離子強度過高，則降低蛋 白質的帶電量（壓縮雙電層），使電泳速度減慢。所以常用離子強度為0.02?0. 2之間。

(四） 支持介質

對支持介質的要求是應具惰性較大的材料，且不與被分離的樣品或緩沖液起化學反應。 此外，還要求具有一定的堅韌度，不易斷裂，容易保存。由于各種介質的精確結構對一種 被分離物的移動速度有很大影響，所以對支持介質的選擇應取決于被分離物質的類型。

吸附支持介質的表面對被分離物質具有吸附作用，使分離物質滯留而降低電泳 速度而出現樣品的拖尾。由于對各種物質吸附力不同，因而降低了分離的分辨率。紙的 吸附性較大，醋酸纖維薄膜的吸附作用很小。

電滲在電場中，液體對固體的相對移動稱為電滲（圖3-13-8)。它是由緩沖液的 水分子和支持介質的表面之間所產生的一種相關電荷所引起。由于水是極性分子，如果 濾紙中因含有羥基使濾紙表面帶負電荷，則與濾紙表面接觸的水分子就會以帶正電荷的 一極與濾紙接觸，水分子向濾紙方向移動。由于電滲現象與電泳同時存在，所以電泳時 被分離物質的電泳速度還要受電滲的影響。如血清蛋白低壓電泳，在巴比妥鹽緩沖液pH為8. 6、離子強度為0. 06的條件下進行，蛋白質的 移動方向與具有電滲現象的水溶液移動方向相反，蛋 白質泳動的距離等于電泳泳動距離減去電滲的距離，電泳速度減慢。如果二者移動方向相同，蛋白質泳動 距離是二者之和，則電泳速度加快。用瓊脂凝膠作為 支持介質時，因瓊脂中含有較多的硫酸根，固體表面 帶較多負電荷，電滲現象更明顯。

在pH為8. 6的條件下電泳時，因電滲移動的距 了離大于電泳距離，許多球蛋白均向負極移動，這個現象成為對流免疫電泳的理論基礎。

可用不帶電的有色顏料或用有色的葡聚糖點置在支持介質的二端中間，待電泳后觀察電滲作用相對于這些物質的移動方向和距離。