(―)科內比較

從現有的資料來看，眼鏡蛇科蛇毒中的NGF分子量都在25 000左右，都由兩個相似 或相同的多肽鏈組成，等電點在6. 7?10. 0之間，含糖量都不多。在眼鏡蛇毒中，只有綠曼 巴pzWcfc)蛇毒NGF的分子量較大，約為34 000。

響尾蛇毒NGF有不少以二聚體的形式存在。如C. adamanteus、Crotalus d. terrificus、A. Contortrix laticinctus、C. atrox 熱 Bothrops 扣raraca蛇毒中的NGF多能夠以二聚體的形式存在，如以聚集狀態存在，分子量可在 40 000?50 000之間。以單體形式存在，分子量在25 000左右。從A. rAo<iostowa和a丨mz蛇毒中分離的 NGF子量較大，約為35 000,含糖量也較高，值得注意的是后兩種蛇毒NGF的獲得率 相對很低。絕大多數響尾蛇毒NGF的等電點為8. 0?10. 5。。。。。。。  。。

對蝰蛇毒NGF的純化不多，主要資料來源于對和兩種蛇毒NGF的研究。這兩種蛇毒NGF的分子量在35 000左右，為糖蛋白。

(二）科間比較

用抗蛇毒NGF的血清和其他蛇毒NGF進行雙向免疫擴散試驗,發現這 種抗血清與蛇毒 NGF 有交叉反應，但所需NGF的濃度要比my'a蛇毒中NGF高得多。如果先把抗血清與其他蛇毒NGF —起溫育，然后加到體外培養的神經節培養液中，結果發現NGF 活性降低較少（6%)，而 蛇毒NGF活性降低約為12%。盡管交叉反應不是很強，但比鼠額下腺NGF對抗m知 NGF血清的反應要大，后者僅有1%的交叉反應，而2種NGF的氨基酸順序有65%同 源。Bailey等(1976)也做了相似的試驗，證實了上述結果，有一點不同的地方是，他的實驗 結果其交叉反應性比較大，在5%?50%之間，多數NGF和抗血清有20%?25%的交叉 反應。

從上述實驗可以看出，盡管不同科甚至同科不同種蛇毒NGF在抗原性上有一定的 差別，但蛇毒NGF總的說來是同源的。可以根據分子量以及含糖量不同，把蛇毒NGF分 為兩類：—類為隊 Agkistrodon piscivorus、C. adamanteus、Bothrops jararaca、N. naja、蛇毒中分離出來的NGF，它們的分子量在25 000左右，由兩個相似或相同的亞單位組成，每個亞單位分子量13 000左右，不含糖 或含糖量很低，鼠額下腺NGF的B-亞單位也屬于此類。第二類為rhodostoma、V. ammodytes ammodytes 和 V. russellisi另—實驗室的研究結果）蛇毒中分 

離出來的NGF,這些NGF的分子量較大，含有10%?20%的碳水化合物，有些以二聚體 形式存在，有的存在方式不清楚。假如把          第二類NGF的碳水化合物除去，它們的分子量 和          第一類NGF相近，這說明兩類NGF的主要差別可能在于糖鏈部分。應該注意的是現 在分離出的所謂含糖NGF實際上還沒有真正得到純品，有些學者在分析部分純化的 NGF時發現NGF含有糖，但分析真正純化后的NGF時發現并無糖的成分。另外，對 蛇毒NGF有兩種報道，一種認為含糖，另一種認為不含糖，這也應該引起 注意。也許在脊椎動物中只有一種不含糖類型的NGF，有關含糖NGF的報道可能是因為 樣品污染的結果。

(三）蛇毒NGF和鼠NGF的比較

鼠額下腺NGF是一個含a、卩和7 3個亞單位的大分子化合物，沉降系數為7S，其中p 亞基可以從腺體勻漿物中直接分離出來，而且有生物活性。卩亞單位含有兩個相同的肽 鏈，每個肽鏈含有118個氨基酸殘基，它的氨基酸順序已被測出。iV. my'a蛇毒中NGF的 部分序列也已經被測出，與鼠NGF相應部位比較其同源性高達64%，如圖3-12-2所示。

蛋白一級結構的同源性說明了基因的同源性。有趣的是^知蛇毒和鼠NGF與胰 島素前體類蛋白質在一級結構上也相似，都有20%的氨基酸相同，這說明蛇毒NGF、鼠 NGF和胰島素前體類蛋白質由共同的祖先進化而來。不同NGF之間的差別(如知 NGF和鼠NGF)比NGF和胰島素前體類蛋白之間的差別要小，這說明從很早以前這兩 類蛋白就從共同的祖先分開，但都保留了共同的固有結構。對鼠NGF和蛇毒 NGF的三維結構知道得不多，但有證據表明二者的三維結構相似。對鼠NGF研究發現它 含有3個Try殘基，其中一個殘基在分子表面，一個殘基包埋在分子內部，還有一個部分 暴露。n—蛇毒NGF含有4個Try殘基，這4個Try對維持NGF的生物活性有重 要作用，它們都能被N-溴代琥珀酰亞胺(NBS)氧化，說明這些殘基處在分子的表面。用 NBS滴定2種NGF，發現滴定曲線相似，可能Mya mya蛇毒NGF的Try分布和鼠額下 腺NGF相似。my'a蛇毒中NGF不能和鼠NGF的a或7亞單位形成復合物。而p 亞單位則能與《和V亞單位形成完整的NGF，這可能因為蛇毒NGF的羧基端沒有精氨 酸殘基所致，而這種殘基是形成復合物必需的。

TV咖NGF和鼠NGF的生物學功能相似，二者的作用都和劑量有關，但從NGF的活性只有鼠NGF的50%。如用幼鼠做試驗，產生同樣效果時，NGF 的用量比鼠NGF高3倍，但組織學檢查證明它們的生物學效應相同。NGF和神經質膜上 受體結合是刺激胚胎組織神經突觸伸長的先決條件，對知NGF和鼠125I-NGF競 爭結合的研究發現，加入蛇毒NGF后，原來與組織結合的125I-NGF有80%脫離原組織。 用來標記的鼠NGF代替蛇毒NGF也有相似的結果，這說明和鼠NGF與受體的結合部位是相同的。

用抗鼠NGF血清在體外與蛇毒NGF作用，發現它可以部分抑制和蛇毒中 NGF 的活性，抑制率分別為6%、6%、12%和12%。如果用抗n— NGF血清在體外與鼠NGF作用,抗血清 只能抑制活性的1%。盡管如此，這兩種來源的NGF同源性還是明顯的。蛇毒NGF和鼠 NGF之間的同源關系還可以從兩類動物的分泌器官相似性看出。蛇的毒腺實際上是一種高度進化的腮腺。腺體的后部是主要分泌部位，分泌管上皮細胞含有7顆粒，這種顆粒的 大小、密度和分布都和雄鼠額下腺卷曲管上皮細胞內的顆粒相似。二者的腺體不但含有起 消化和水解作用的酶，而且都有毒性。鼠額下腺可能是哺乳動物中惟一分泌毒物的腺體。