(一） 概述

所謂精氨酸酯水解酶，是指能夠水解精氨酸所形成的肽鍵或酯鍵的酶。這是一類特殊 的蛋白酶，它們不能水解動物蛋白酶或蛇毒內肽酶的底物(如酪蛋白和血紅蛋白等）。根據 水解底物的特異性不同，可以把精氨酸酯酶分成三類: 第一類只作用于合成的精氨酸酯底 物，如TAME和BAEE，在自然界中還沒有發現有天然的底物，也不知道它們的生理作 用； 第二類為作用于纖維蛋白原等血液因子的酶，它們進入體內后促進或抑制血液的凝 固；第三類是激肽釋放酶，能夠在體內水解血漿中的激膚原而釋放出舒緩激肽或類似物。 由于激肽的釋放，使這類精氨酸酯酶具有降壓、使毛細血管透性增加和產生疼痛等生理作 用。與前兩類精氨酸酯酶相比，激肽釋放酶水解合成精氨酸酯底物(如TAME和BAEE 等)的活性較弱，對抑制劑的敏感性也低。 第二類精氨酸酯酶我們將在以后的章節中討論，           第三類精氨酸酯酶在本節的另一部分中作介紹，這里僅對精氨酸酯酶的大致情況以及第 一類精氨酸酯酶作些論述，其中還包括一些現在還不知或未測定功能的精氨酸酯酶。

除眼鏡王蛇 蛇毒對精氨酸酯顯示較弱的水解活性外，至今所 檢查過的眼鏡蛇科和海蛇科的蛇毒均不顯示任何精氨酸酯水解酶活性。如表3-11-5、表 3-11-6和表3-11-7所示，這種酶在響尾蛇毒和蝰蛇蛇毒中分布很廣。Deutsch等(1955)首 先發現蛇毒中存在這種酶，他們利用BAEE為底物，發現15種蝮蛇、響尾蛇和蝰蛇蛇毒 中含有這種酶。以后Hamberg等（1957)和Devi等（1959)報道美洲矛頭蝮（BoMro和 知mmoz)蛇毒中“激肽釋放”和“凝血”活性與精氨酸酶水解酶有關，而與酪蛋白水解活性 無關。從那以后，許多研究者分別從美洲矛頭蝮 蛇毒、日本蝮 蛇毒和銅頭 蛇毒中分離出了這種酶。

(二） 分離、純化和理化性質

Sato等(1965)首先將蝮蛇日本亞種 蛇毒中的精氨酸酯酶分成3 個組分，即類凝血酶、舒緩激肽釋放酶和毛細血管透性增加因子。0Shima(1969)測定了 32 種蛇毒中精氨酸酯酶、激肽釋放酶和類凝血酶活力的分布。Viljoen等(1979)也從加蓬咝 蝰 蛇毒中分離出了 3種精氨酸酯酶，它們分別具有類凝血酶、激肽釋放酶 和纖維蛋白溶解酶的活性。所有這些酶都屬于絲氨酸蛋白酶，其底物專一性很強，只作用 于體內特定蛋白底物(如纖維蛋白原和激肽原等）中特定的肽鍵，常見的是Arg-X肽鍵， 可被絲氨酸蛋白酶抑制劑DFP所抑制。由于它們能夠水解BAEE和TAME等精氨酸 酯，因而把它們稱為精氨酸酯水解酶，也有人直接稱為精氨酸酯酶。

除上述提到的精氨酸酯酶外，近些年還從其他蛇毒中分離出了一些精氨酸酯酶。 White等(1982)從西部菱斑響尾蛇WrM)蛇毒中分離出一種酸性精氨酸酯酶， 用分子篩層析測得分子量為25 000,對BAEE和BAPNA的水解作用相似，其水解速度 和商品胰蛋白酶相似;Sugihara等(1984)從中國烙鐵頭 蛇毒中分離出一種精氨酸酯酶,命名為ME-5，lg粗毒可以獲得1. 4mg精氨酸酯酶。該組分是一種糖蛋白，能夠水解TAME，還能引起毛細血管通透性增加，但無促凝活性，也無舒 緩激肽釋放活性。該酶對熱穩定，在PH5?9范圍內也穩定，分子量為33 000,等電點為 6. 48。珞鐵頭(T.MucrosgMamatos)蛇毒含有5種精氣酸醋酶，命名為ME-1、ME-2、ME- 3、ME-4、ME-5,其中ME-3、ME-4和ME-5可以被DFP抑制，說明分子中的絲氨酸羥基 對酶的活性十分重要。這5種酶都能引起毛細血管通透性增加，但都無促凝活性，它們的 氨基酸組成與其他蛇毒中的精氦酸酯酶不同。Silva等(1985)從蛇毒中分離出一種精氨酸酯酶，其酶活性為181fmi0l/min . mg,比粗毒高10. 9倍。該酶 無類凝血酶和激肽釋放活性，以Bz-L-Arg-O-Et為底物測定Km為1. 14X10_3mol/L， Vmax為181. 7/xmol/min . mg。該酶可以被苯甲脒可逆抑制（Ki為8. 9X10_4mol/L)，被 DFP不可逆抑制。