蛇毒中含有抗凝組分而具抗凝活性。對蛇毒抗凝組分的研究與應用開始于本世紀60 年代。1963年Reid等人觀察被馬來西亞紅口蝮蛇咬傷的病人時發現，病人發生嚴重出 血。經動物實驗證實，該蛇毒能使血中纖維蛋白原明顯降低甚至消失而有抗凝作用。1968 年Bell報道用已經分離純化的馬來西亞紅口螺蛇蛇毒抗凝 Ancrod治療血栓病獲得抗凝效果。Ouyang等分別從尖吻蝮蛇毒和珞鐵頭蛇毒中純化出 抗凝組分。1980年Sugihard等也從臺灣五步蛇毒中純化到兩個抗凝血因子和A20 年代起，我國開始對蛇毒抗凝組分研究并用于臨床。1978年中國科學院昆明動物研究所 首先對產于我國的尖吻蝮蛇毒進行研究并提取蛇毒酶制劑——去纖酶，福州醫學院王清 川、劉廣芬教授研制，福建省三明制藥廠生產的蘄蛇酶，經生化、藥理諸方面的研究發現與 蛇毒抗凝劑Ancrod有類似作用。繼之，遼寧省蛇毒研究協作組從蛇島黑眉蝮蛇毒中提取酶制劑 蛇島峻蛇抗檢酶（由于蛇島蝮蛇資源有限，1981年國務院下令蛇島為國家自然保護區，蛇島蝮蛇抗栓酶未被批準生產）。1981年 中國人民解放軍238醫院與沈陽藥學院合作，從東北陸生白眉蝮烏蘇里亞種（蛇毒中提取酶制劑 清檢酶(又名複蛇抗檢酶）。

       1984年中國醫科大學從浙江蝮蛇Pallas)蛇毒中提取酶制劑——江浙蝮蛇抗栓酶， 經動物毒理、藥理實驗及臨床應用，證實有良好的抗凝療效，用于治療缺血性血管病等疾 病取得顯著效果。

年經動物毒理、藥理實驗及臨床應用，證實有良好的抗凝療效,用于治療血栓性血管 病取得顯著效果。1985年中國醫科大學從江浙蝮蛇Pallas)蛇毒中提取酶 制劑——江浙蝮蛇抗栓酶，但因殘留神經毒較多，導致毒副作用明顯，影響臨床效果，后雖 然改成3號精制產品,其實際有效成分仍明顯少于清栓酶。以后國內仿制藥廠近百家，產 品質量良莠不齊，各省質量標準亦不一致，故衛生部藥政管理局于1997年初，為統一標準 和跟國際接軌，制訂了蛇毒類凝血酶品種的統一質量標準，規定名稱為“降纖酶”，純度必 須為電泳純(即一條電泳帶），這一新產品無疑是高質量的全新制劑。但從目前的生產技術 而言,因純度要求提高而大幅度提高了生產成本，致使降纖酶的零售價比清栓酶價格高出 近百倍，而臨床療效兩者并無顯著差異，且降纖酶對急性血栓病療效明顯，恢復期及后遺 癥效果不佳，絕大多數患者在經濟上難以承受。故從國情實際出發，清栓酶(蝮蛇抗栓酶) 應為價廉物美的老產品值得保留。
 

(―)蝮蛇毒的組成及理化性質

0. 蝮蛇毒的一般特性蛇毒成分復雜，含有酶類、非酶活性蛋白質、毒素、有機物質 以及少量無機離子，具有多種多樣的生理和毒理作用。除尖吻蝮蛇毒為無色液體外，一般 蝮蛇毒為淡黃色半透明液體，呈弱酸性，比重為1.03?1.06,常溫下易失活，遇高溫形成 絮狀沉淀。經冰凍干燥后呈結晶樣顆粒或粉末，可保存很長時間。遇重金屬離子、酚類和 乙醇等亦能沉淀。易被氧化劑、還原劑、強酸、強堿等破壞，亦易被蛋白水解酶所分解。

1. 蝮蛇毒中的酶類近年來，由于采用了先進的層析分離手段，許多蝮蛇毒組分得 到了純化，從聚丙烯酰胺凝膠電泳圖譜上分析，蝮蛇粗毒含約20條蛋白染色帶。1976年， 昆明動物研究所四室測定了湖南蝮蛇毒中12種酶活性，即：蛋白水解酶、精氨酸酯酶、L- 氨基酸氧化酶、堿性磷酸單酯酶、磷酸二酯酶、5'-核苷酸酶、ATP酶、核苷焦磷酸酶、核糖 核酸酶、磷脂酶A2等。1976年上海生理研究所第一研究室蛇毒組用DEAE-纖維素分離 浙江短尾蝮蛇毒，得到5個主要蛋白峰，并對其中的神經毒組分進行了研究。對該種蛇毒 純化的成分有:磷酸二酯酶、突觸前神經毒素、堿性磷脂酶A2、酸性磷脂酶A2、類凝血酶、 激肽釋放酶、舒緩激肽增強肽及突觸后神經毒素等。1978年涂光儔等應用DEAE- Sephadex A-50又對浙江產蝮蛇毒分離，獲得14個蛋白峰，并測定了各組分的酶活性。 1980年陳建智等用DEAE-Sephadex A-50先后對蛇島產蝮蛇毒及長白山陸生白眉蝮蛇毒進行了柱層析分離，測得蛇島產蝮蛇毒16個蛋白峰的致死活性、出血活性、舒緩激肽釋 放活性和另外7種酶的活性。后者包括蛋白水解酶、精氨酸酯酶、堿性磷酸單酯酶、磷酸二 酯酶、核糖核酸酶、L-氨基酸氧化酶、5'-核苷酸酶等；同時還測定了長白山陸生白眉蝮蛇 毒12個蛋白峰及各組分的活性。陳氏指出，蛇島產蝮蛇毒與浙江產蝮蛇毒等柱層析圖譜 和各分離組分的生理活性分布不同。同年滕國強等人報道了皖南山區五步蛇毒用DEAE- Cellulose和DE 22柱層析分離結果，總共獲得15個蛋白峰，對蛋白水解酶、精氨酸酯酶 和磷脂酶A2等酶的活力進行了測定。目前，蝮蛇毒類凝血酶及舒緩激肽釋放酶等已獲得 聚丙烯酰胺電泳純的樣品，許多組分的氨基酸組成也得到了測定。總的來說，蝮蛇毒中主 要含精氨酸酯酶、類凝血酶、激肽釋放酶、纖溶酶、磷脂酶A2等，并以富含精氨酸酯酶，缺 少乙酰膽堿酯酶為特征。

(1) 精氨酸酯酶:屬絲氨酸蛋白酶，其底物專一性強，不作用于一般蛋白質底物，只作 用于纖維蛋白原和激肽原等蛋白分子中的特定肽鍵。類凝血酶、激肽釋放酶和纖溶酶一般 都具有精氨酸酯酶活性。

① 類凝血酶..蝮蛇毒中類凝血酶的精氨酸酯酶活力較高，它與凝血系統關系密切，已 從19種蝮亞科蛇毒中分離出類凝血酶。1981年趙忠信、夏盛強等確定了這種酶在東北長 白山陸生白眉蝮蛇毒中的活性與制備方法，同年王淳等亦從尖吻蝮蛇毒中純化出兩種類 凝血酶,滕國強（1982)從皖南尖吻蝮蛇毒中純化出該酶，管利豐等(1982)和孫菁等(1986) 分別檢測出浙江短尾蝮蛇毒和江西產蝮蛇毒中的類凝血酶的活性。絕大多數類凝血酶系 糖蛋白，大多數酶的分子量都在30 000?40 000之間。浙江短尾蝮類凝血酶分子量 43 000,由332個氨基酸組成。尖吻蝮類凝血酶分子量為33 500,由263個氨基酸組成。所 有已純化的蛇毒類凝血酶均富含天門冬氨酸或門冬氨酰胺和谷氨酸。蛇毒類凝血酶一般 不引起血小板聚集，不激活凝血因子V、凝血因子W及凝血因子XI。從銅頭蝮及浙江蝮蛇 毒分離得到的類凝血酶作用特點是:它們首先從纖維蛋白原中釋放出血纖肽B(FPB)，再 緩慢釋放血纖肽A(FPA),其凝血能力很弱，所形成的凝塊遠不如人凝血酶所形成的凝血 塊結實。由于類凝血酶不能激活XI因子，能直接作用于纖維蛋白原使之凝集，所以它在 體外起凝血作用；但在體內，由于它作用生成的纖維蛋白質凝塊沒有側鏈交聯，易被血 流沖散并進一步被纖維蛋白溶酶降解，故在臨床上表現為抗凝作用。尖吻蝮蛇毒去纖酶 能降解纖維蛋白原的《-鏈，作用和上述類凝血酶相類似。我國目前的蝮蛇毒酶制劑去纖 酶、清栓酶、江浙蝮蛇抗栓酶均系非純化單一的類凝血酶，它們作為抗凝劑用于臨床治 療血栓病有療效。

② 激肽釋放酶:即舒緩激肽釋放酶，又稱激肽原酶或通透性因子，屬于絲氨酸蛋白酶， 該酶在蝮亞科蛇毒中活力較高。已經從浙江蝮蛇毒中純化出激肽釋放酶I，分子量約為 30 000,穩定性較差，它的作用是使小動脈毛細血管擴張。

③ 纖溶酶:蝮亞科蛇毒中含該組分。分離出的浙江短尾蝮蛇毒第三個精氨酸酯酶活力 峰具有纖溶活性。

(2) 蛋白水解酶:屬金屬蛋白酶類，其底物較廣，可水解酪蛋白和變性血紅蛋白等。該 酶與蛇傷后組織出血和壞死有關。

(3) 磷脂酶A2:磷脂酶A2(PLA2)選擇性地水解Sn-三磷酸甘油酯2位上的酯酰鍵。