在介紹抗蛇毒血清制備時(shí),我們先認(rèn)識(shí)一下什么叫抗原,什么叫抗體;抗體在體內(nèi)是如何產(chǎn)生的。
抗原(Antigen)是一種物質(zhì)(如細(xì)菌、病毒、血清等),能刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)引起一系列的免疫反應(yīng),產(chǎn)生抗體和各種淋巴因子,并能與相應(yīng)的抗體或致敏淋巴細(xì)胞在體內(nèi)或體外發(fā)生特異的結(jié)合反應(yīng)。
抗體(Antihody)是在抗原刺激后,機(jī)體的免疫B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的免疫球蛋白,能與之相應(yīng)的抗原產(chǎn)生特異的結(jié)合反應(yīng)。
抗蛇毒血清就是利用這一原理,以蛇毒作抗原,免疫動(dòng)物在蛇毒的刺激下,發(fā)生一系列的免疫反應(yīng)后產(chǎn)生免疫球蛋白——抗體,此抗體遇相應(yīng)的蛇毒能特異性結(jié)合而使蛇毒失去毒性。抗原在體內(nèi)產(chǎn)生抗體的過程分以下三個(gè)階段。一是感應(yīng)階段,即識(shí)別抗原階段,當(dāng)顆粒抗原進(jìn)入機(jī)體后,先由巨噬細(xì)胞吞噬處理,經(jīng)巨噬細(xì)胞的各種酶類將顆粒抗原降解,使抗原決定簇與巨噬細(xì)胞的mRNA結(jié)合,然后將抗原信息傳遞給T細(xì)胞,T細(xì)胞再傳遞給B細(xì)胞,B細(xì)胞接受刺激產(chǎn)生抗體。二是反應(yīng)階段,B細(xì)胞在酶的作用下,分化成漿細(xì)胞,再分化成具有記憶功能的淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞,漿細(xì)胞可產(chǎn)生抗體。三是效應(yīng)階段,大量產(chǎn)生的淋巴因子和抗體、效應(yīng)T細(xì)胞和各種抗體發(fā)生免疫特異反應(yīng)的階段,如殺傷靶細(xì)胞作用,即中和蛇毒,而細(xì)胞本身不受傷害。

上述是抗體在體內(nèi)產(chǎn)生的機(jī)理。有人提出,如果把蛇毒處理成抗原后,直接注射到人體里面,不就產(chǎn)生抗體不怕被毒蛇咬了嗎?從理論上講是完全可行的。但蛇毒成分復(fù)雜,分子量小,免疫抗原性差,要反復(fù)多次注射才能達(dá)到一定的抗體水平。若不定期反復(fù)注射,抗體也會(huì)下降,一旦被蛇咬傷,抗體正降至低峰,還是要注射抗蛇毒血清。但有一種情況,即從事和毒蛇打交道而經(jīng)常被毒蛇咬傷者為數(shù)十次之多者,該傷者體內(nèi)有可能具有較高的抗體水平,可以不注射抗蛇毒血清。不過該種傷者因多次被毒蛇咬傷,等于是致敏體質(zhì),若間隔較長時(shí)間后再次被同一種毒蛇咬傷,很可能產(chǎn)生休克反應(yīng)。此非蛇毒中毒反應(yīng),而是抗原抗體復(fù)合物引起的過敏反應(yīng)。此時(shí)應(yīng)立即注射抗過敏藥物搶救,如延誤了,同樣會(huì)造成生命危險(xiǎn)。

通過上述介紹,對(duì)抗蛇毒血清的制備就不難理解了。抗蛇毒血清的制備條件是蛇毒(抗原)、動(dòng)物(免疫對(duì)象)和純化設(shè)備。
1.抗原
選擇健康毒蛇取毒,所取新鮮毒液經(jīng)離心處理后凍干備用。干燥之蛇毒需測定毒力,選擇毒性強(qiáng),抗原譜廣(經(jīng)過免疫電泳檢驗(yàn))的蛇毒作抗原之用。作為抗原用的蛇毒使用前應(yīng)除菌處理,因蛇毒中常混有致病的厭氧菌。由于蛇毒毒性強(qiáng)、分子量小、抗原性差,加大免疫劑量免疫動(dòng)物易中毒死亡,所以要對(duì)蛇毒作減毒處理。通常采用甲醛法處理,使其毒性大部分失去而抗原性不變。
2.動(dòng)物
免疫動(dòng)物可用家兔、綿羊、馬等。通常采用馬是由于馬的軀體大,采血量多。免疫用動(dòng)物必須為經(jīng)檢疫合格的健康動(dòng)物。
3.免疫
免疫劑量根據(jù)抗原性質(zhì)而定,通常從小劑量開始,逐步增量。
(1)基免(基礎(chǔ)免疫)。開始第一針注射為基免,注射量很小,使免疫動(dòng)物有個(gè)適應(yīng)過程。有的再注射第二針。然后休息1~2個(gè)月。
(2)超免。休息以后開始超免,即逐步加大劑量,每星期注射一針,一般連續(xù)5~6針后試血,當(dāng)抗體達(dá)到一定水平后可采血。休息一星期后繼續(xù)免疫,試血,再采血。
(3)抗體純化。免疫球蛋白純化有多種,如鹽析法、冷乙醇沉淀法、酸沉法、離子交換層析法、凝膠過濾法、電泳法等。我國采用硫酸銨鹽析法,方便而經(jīng)濟(jì),缺點(diǎn)是純度稍差些。若要高純度的抗體,常以幾個(gè)方法結(jié)合在一起可達(dá)到滿意效果。




